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30%Acr-Bis(29:1)

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BKM-AB
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产品简介: 

             30% Acr-Bis(29:1)即为含 30%acrylamide-bisacrylamide 的混合液,其中 acrylamide 和bisacryis的比列为29:1。

 

             常用于配制丙烯酰胺凝胶(PAGE 胶),包括SDS-PAGE 胶等。

 

使用说明:(SDS-PAGE凝胶配制方法参考)

 

根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度 ,不同浓度的 SDS-PAGE 分离胶的最佳分离范围:

 

SDS-PAGE 分离胶浓度

最佳分离范围

6%

50-150KD

8%

30-90KD

10%

20-80KD

12%

12-60KD

15%

10-40KD

 

 

1.按照下表配制 SDS-PAGE 分离胶

 

成分

配制不同体积 SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(毫升)

6%胶

5

10

15

20

30

50

蒸馏水

2.6

5.3

7.9

10.6

15.9

26.5

30%Acr-Bis(29:1)

1.0

2.0

3.0

4.0

6.0

10.0

1.5M Tris, pH8.8

1.3

2.5

3.8

5.0

7.5

12.5

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

10%过硫酸铵

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

TEMED

0.005

0.01

0.015

0.02

0.03

0.05

成分

配制不同体积 SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(毫升)

8%胶

5

10

15

20

30

50

蒸馏水

2.3

4.6

6.9

9.3

13.9

23.2

30%Acr-Bis(29:1)

1.3

2.7

4.0

5.3

8.0

13.3

1.5M Tris, pH8.8

1.3

2.5

3.8

5.0

7.5

12.5

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

10%过硫酸铵

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

TEMED

       0.005

        0.01

      0.015

        0.02

        0.03

       0.05

成分

配制不同体积 SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(毫升)

10%胶

5

10

15

20

30

50

蒸馏水

2.0

4.0

5.9

7.9

11.9

19.8

30%Acr-Bis(29:1)

1.7

3.3

5.0

6.7

10.0

16.7

1.5M Tris, pH8.8

1.3

2.5

3.8

5.0

7.5

12.5

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

10%过硫酸铵

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

TEMED

0.005

0.01

0.015

0.02

0.03

0.05

成分

配制不同体积 SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(毫升)

12%胶

5

10

15

20

30

50

蒸馏水

1.6

3.3

4.9

6.6

9.9

16.5

30%Acr-Bis(29:1)

2.0

4.0

6.0

8.0

12.0

20.0

1.5M Tris, pH8.8

1.3

2.5

3.8

5.0

7.5

12.5

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

10%过硫酸铵

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

TEMED

0.005

0.01

0.015

0.02

0.03

0.05

成分

配制不同体积 SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(毫升)

15%胶

5

10

15

20

30

50

蒸馏水

1.1

2.3

3.4

4.6

6.9

11.4

30%Acr-Bis(29:1)

2.5

5.0

7.5

10.0

15.0

25.0

1.5M Tris, pH8.8

1.3

2.5

3.8

5.0

7.5

12.5

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

10%过硫酸铵

0.05

0.1

0.15

0.2

0.3

0.5

TEMED

0.005

0.01

0.015

0.02

0.03

0.05

 

 :如果配制非变性胶 ,参考上述配方 ,不加 10%SDS 即可配制成非变性 PAGE 胶。

2. 按照下表配制 SDS-PAGE 浓缩胶(也称堆积胶、积层胶或上层胶):

 

成分

配制不同体积 SDS-PAGE 浓缩胶所需各成分的体积(毫升)

5%胶

2

3

4

6

8

10

蒸馏水

1.4

2.1

2.7

4.1

5.5

6.8

30%Acr-Bis(29:1)

0.33

0.5

0.67

1.0

1.3

1.7

1M Tris, pH6.8

0.25

0.38

0.5

0.75

1.0

1.25

10%SDS

0.02

0.03

0.04

0.06

0.08

0.1

10%过硫酸铵

0.02

0.03

0.04

0.06

0.08

0.1

TEMED

0.002

0.003

0.004

0.006

0.008

0.01

 

注:通常 10-30 分钟内胶会凝固。注:具体的凝固时间和温度及光照有关,说明书中10%过硫酸铵和 TEMED的推荐用量是室温为 25℃时的推荐用量。当室温低于 25℃或胶不凝固时,可以适当同时加大 10%过硫酸铵和 TEMED 的用量。

 

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