产品简介:
30% Acr-Bis(29:1)即为含 30%acrylamide-bisacrylamide 的混合液,其中 acrylamide 和bisacryis的比列为29:1。
常用于配制丙烯酰胺凝胶(PAGE 胶),包括SDS-PAGE 胶等。
使用说明:(SDS-PAGE凝胶配制方法参考)
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度 ,不同浓度的 SDS-PAGE 分离胶的最佳分离范围:
|
SDS-PAGE 分离胶浓度 |
最佳分离范围 |
|
6% |
50-150KD |
|
8% |
30-90KD |
|
10% |
20-80KD |
|
12% |
12-60KD |
|
15% |
10-40KD |
1.按照下表配制 SDS-PAGE 分离胶
|
成分 |
配制不同体积 SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(毫升) |
|||||
|
6%胶 |
5 |
10 |
15 |
20 |
30 |
50 |
|
蒸馏水 |
2.6 |
5.3 |
7.9 |
10.6 |
15.9 |
26.5 |
|
30%Acr-Bis(29:1) |
1.0 |
2.0 |
3.0 |
4.0 |
6.0 |
10.0 |
|
1.5M Tris, pH8.8 |
1.3 |
2.5 |
3.8 |
5.0 |
7.5 |
12.5 |
|
10%SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
|
10%过硫酸铵 |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
|
TEMED |
0.005 |
0.01 |
0.015 |
0.02 |
0.03 |
0.05 |
|
成分 |
配制不同体积 SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(毫升) |
|||||
|
8%胶 |
5 |
10 |
15 |
20 |
30 |
50 |
|
蒸馏水 |
2.3 |
4.6 |
6.9 |
9.3 |
13.9 |
23.2 |
|
30%Acr-Bis(29:1) |
1.3 |
2.7 |
4.0 |
5.3 |
8.0 |
13.3 |
|
1.5M Tris, pH8.8 |
1.3 |
2.5 |
3.8 |
5.0 |
7.5 |
12.5 |
|
10%SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
|
10%过硫酸铵 |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
|
TEMED |
0.005 |
0.01 |
0.015 |
0.02 |
0.03 |
0.05 |
|
成分 |
配制不同体积 SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(毫升) |
|||||
|
10%胶 |
5 |
10 |
15 |
20 |
30 |
50 |
|
蒸馏水 |
2.0 |
4.0 |
5.9 |
7.9 |
11.9 |
19.8 |
|
30%Acr-Bis(29:1) |
1.7 |
3.3 |
5.0 |
6.7 |
10.0 |
16.7 |
|
1.5M Tris, pH8.8 |
1.3 |
2.5 |
3.8 |
5.0 |
7.5 |
12.5 |
|
10%SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
|
10%过硫酸铵 |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
|
TEMED |
0.005 |
0.01 |
0.015 |
0.02 |
0.03 |
0.05 |
|
成分 |
配制不同体积 SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(毫升) |
|||||
|
12%胶 |
5 |
10 |
15 |
20 |
30 |
50 |
|
蒸馏水 |
1.6 |
3.3 |
4.9 |
6.6 |
9.9 |
16.5 |
|
30%Acr-Bis(29:1) |
2.0 |
4.0 |
6.0 |
8.0 |
12.0 |
20.0 |
|
1.5M Tris, pH8.8 |
1.3 |
2.5 |
3.8 |
5.0 |
7.5 |
12.5 |
|
10%SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
|
10%过硫酸铵 |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
|
TEMED |
0.005 |
0.01 |
0.015 |
0.02 |
0.03 |
0.05 |
|
成分 |
配制不同体积 SDS-PAGE 分离胶所需各成分的体积(毫升) |
|||||
|
15%胶 |
5 |
10 |
15 |
20 |
30 |
50 |
|
蒸馏水 |
1.1 |
2.3 |
3.4 |
4.6 |
6.9 |
11.4 |
|
30%Acr-Bis(29:1) |
2.5 |
5.0 |
7.5 |
10.0 |
15.0 |
25.0 |
|
1.5M Tris, pH8.8 |
1.3 |
2.5 |
3.8 |
5.0 |
7.5 |
12.5 |
|
10%SDS |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
|
10%过硫酸铵 |
0.05 |
0.1 |
0.15 |
0.2 |
0.3 |
0.5 |
|
TEMED |
0.005 |
0.01 |
0.015 |
0.02 |
0.03 |
0.05 |
注 :如果配制非变性胶 ,参考上述配方 ,不加 10%SDS 即可配制成非变性 PAGE 胶。
2. 按照下表配制 SDS-PAGE 浓缩胶(也称堆积胶、积层胶或上层胶):
|
成分 |
配制不同体积 SDS-PAGE 浓缩胶所需各成分的体积(毫升) |
|||||
|
5%胶 |
2 |
3 |
4 |
6 |
8 |
10 |
|
蒸馏水 |
1.4 |
2.1 |
2.7 |
4.1 |
5.5 |
6.8 |
|
30%Acr-Bis(29:1) |
0.33 |
0.5 |
0.67 |
1.0 |
1.3 |
1.7 |
|
1M Tris, pH6.8 |
0.25 |
0.38 |
0.5 |
0.75 |
1.0 |
1.25 |
|
10%SDS |
0.02 |
0.03 |
0.04 |
0.06 |
0.08 |
0.1 |
|
10%过硫酸铵 |
0.02 |
0.03 |
0.04 |
0.06 |
0.08 |
0.1 |
|
TEMED |
0.002 |
0.003 |
0.004 |
0.006 |
0.008 |
0.01 |
注:通常 10-30 分钟内胶会凝固。注:具体的凝固时间和温度及光照有关,说明书中10%过硫酸铵和 TEMED的推荐用量是室温为 25℃时的推荐用量。当室温低于 25℃或胶不凝固时,可以适当同时加大 10%过硫酸铵和 TEMED 的用量。
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