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低熔点琼脂糖

  • CAS No.:9012-36-6
  • 分子式:C10H15N3O3
  • 分子量:225.25
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BKM-A05083
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英文名称:Agarose(Low melting gel)

CAS:9012-36-6

外观(性状):白色粉末

熔点范围:62-68℃ ,凝胶温度 ( 1.0%):24-29℃

 

琼脂糖凝胶制备
用 1×TBE 溶液配制 1%浓度琼脂糖凝胶
1. 用于制备胶液的锥形瓶体积应为胶液体积的 2-4 倍,缓慢向缓冲液中加入琼脂糖,边加边搅拌,防止琼脂糖聚集。记录瓶体和溶液总重量。
2. 微波炉高火加热 30s,根据配制的溶液体积调整加热时间。加热时间与微波炉、瓶体大小和琼脂糖浓度有关。
3. 摇匀琼脂糖溶液。
4. 再次高火加热 30s,摇匀琼脂糖溶液。
5. 将溶液再次放回微波炉,高火加热至沸腾(大约 10-35s)。接触移动时琼脂糖胶液可能会剧烈沸腾,小心操作,避免烫伤。从微波炉拿出后,室温冷却 1-2min,轻轻摇晃使液体里的气泡溢出。
6. 重新放回微波炉,高火加热,使之沸腾约 15s,观察琼脂糖的溶解状态,如果仍有颗粒存在,重复该步骤直至所有晶体全部溶解。
7. 待琼脂糖完全溶解成液体,重新称量总重量,计算蒸发液体量,用水补齐至原始重量,摇匀液体。
8. 建议胶液冷却至 50-55℃时灌胶,有利于凝胶孔径均匀一致,不至于损伤制胶仪。灌胶前轻轻摇晃琼脂糖溶液,释放胶液中残存的气泡。
9. 向制胶槽中灌胶,一般胶的厚度 3-5mm,灌胶后尽量排除梳孔之间或底部的气泡。

10. 在室温放置(30-45min)使胶充分凝结。

 

如果要制备不同浓度和不同体积的凝胶,请注意以下两点:
1. 在凝胶溶液煮沸前至少进行 2 次摇匀。
2. 胶液沸腾后,每隔 10-15s 观察一次胶液溶解程度(间隔时间取决于胶液浓度和体积)。

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