英文名称：DiBAC4(3)/(bis-(1,3-dibarbituric acid)-trimethine oxanol)
CAS：70363-83-6
纯度：≥98.0%
溶解性：可用 DMSO 溶解成 10mM 的母液储存
使用参考:
一．用荧光显微镜测定膜电位的方法
（1）试剂
DiBAC4(3)，Dulbecco’s MEM(DMEM)，FBS(fetal bovine serum)
（2）方法
1)将消化好的细胞移⾄ 至 DMEM 中。
2)加入 FBS，控制浓度范围在：2～15%。
3)加入 DiBAC4(3)，控制浓度范围在：1～5μmol/L。
4)用荧光显微镜观察刺激后荧光强度的变化。[Ar 激光(488nm)的激光共聚焦显微镜]，由 DiBAC4(3)的荧光会随温度变化而改变，所以必须在 37℃的条件下测定。由于细胞膜的电位会变化，可以观察细胞质内的荧光强度变化。
二. 用酶标仪测定膜电位的方法
（1）试剂
DiBAC4(3)，检测用缓冲液(pH7.4;20mmol/L HEPES；120mmol/L NaCl；2mmol/L KCl；2mmol/LCaCl2；1mmol/LMgCl2；5mmol/L glucose)
（2）方法
1)培养细胞：在微孔板中培养细胞。
2)清洗细胞：用含 5μmol/L DiBAC4(3)的检测用缓冲液 200μL，清洗微孔板中培养的细胞 2 次。
3)染色：在孔板中加入 180μL 含 5μmol/L DiBAC4(3)的检测用缓冲液，在 5%CO2，37℃培养箱中孵育 30 分钟。
4)测定：用荧光酶标仪观察刺 激后荧光强度的变化。由于 DiBAC4(3)的荧光会随温度变化而改变，所以必须在 37℃的条件下测定，加入 20μL 含 DiBAC4(3)的检测用缓冲液，每隔 30 秒测定 1 次荧光变化。
三. 膜电位的标准曲线
（1）原理
膜电位变化时色素的分布也随之变化，所以荧光和吸收也会变化。这种变化程度取决于色素的
分子数和细胞数的比率、色素的浓度以及细胞的种类。膜电位的标准曲线是通过用电极直接测定目
的细胞的膜电位，在该电位所测得的荧光和吸收强度而制得的。
（2）试剂
DiBAC4(3)，PBS
（3）方法
1)样本细胞。
2)取 PBS 中的细胞在 37℃的 CO2 培养箱中孵育 30～60 分钟，然后改变孵育时间，制备不一样的 CO2
浓度的样品。
3)加入 DiBAC4(3)，终浓度为 2μmol/L。
4)20 分钟后，在 517nm 测定各个浓度的荧光强度，并用电极直接测定此时的电位差。
5)用荧光强度和对应的电位差来制作标准曲线。
（4）其他方法
有钾扩散电位和荧光或吸收强度比较的方法。缬氨霉素引起钾扩散电位，钾扩散电位(V)是按照
Nernst 方程计算如下：
V=-RT／F log[K+]in／[K+]out=-59 log[K+]in／[K+]out(mV)
所以在缬氨霉素存在时，通过改变细胞外钾离⼦ 子浓度和细胞内钾离⼦ 子浓度，计算扩散电位，
测定各个电位的荧光或吸收强度，比较后可以得到标准曲线。
注意事项：
&。本产品仅供科研使用。
&。为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
暂无使用说明!
暂无产品问答!
暂无参考文献
扫码关注公众号
中文
英文
